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如何提取DNA粗提和精提的方法?

一、DNA提取(粗提取)

1、酚抽提法:先用蛋酶K、SDS破碎细胞,消化蛋白,然后用酚和酚-氯DNA大小为100-150kb

2、甲酰胺解聚法:破碎细胞同上,然后用高浓度甲酰胺解聚蛋白质与DNA的结合,再透析获得DNA可得DNA200kb左右。

3、玻璃棒缠绕法:用盐酸胍裂解细胞,将裂解物铺于乙醇上,然后用带钩或U型玻璃棒在界面轻搅,DNA沉淀液绕于玻棒。生成DNA约80kb。

4、异丙醇沉淀法:基本同1法,仅用二倍容积异丙醇替代乙醇,可去除小分子RNA(在异丙醇中可溶状态)

5、表面活性剂快速制备法:用Triton X-100A或NP40表面活性剂破碎细胞,然后用蛋白酶K或酚去除蛋白,乙醇沉淀或透析。

6、加热法快速制备:加热96℃-100℃,五分钟,然后离心后取上清,可用于PCR反应。

7、碱变性快速制备:先用NaOH作用20分钟,再加HCI中和,离心后取上清,含少量DNA。

二、DNA的浓缩(精提取)

1、固体聚乙二醇(PEG)浓缩:用透析袋外敷PEG至合适量。

2、丁醇抽提浓缩:DNA溶液中水可分配到正丁醇或仲丁醇,但DNA不会。因此重复几次可显著减少DNA体积。

3、乙醇或异丙醇沉淀:(1)需要阳离子盐的存在,NaAc最常用,NaCl对含SDS样品好,NH4Ac去除dNTP好。PiCl沉淀RNA好,但不能用于反转录前。(2)沉淀温度与时间;0℃一4℃,12000g,10分钟,小于100bp DNA需超速离心。

4、精胺沉淀法:与DNA结合后使DNA结构凝缩沉淀,需在无盐或低盐溶液。

怎么发布宝贝?里面的运费模板和提取方式是什么意思?该怎么填?

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萃取的是离子还是单质?

镍离子和与Mextral204P萃取剂结合。 例如我们在使用Mextral204P的时候要做皂化处理,而处理方式就是用氢氧化钠。这是因为204P萃取剂为磷酸类萃取显酸性,需要用钠离子取代萃取剂上面的氢离子,之后金属阳离子如镍离子夺取钠离子位置和萃取剂发生萃取螯合。纵观整个过程,钠离子是参与了萃取并占领了萃取剂的位置。 除此以外,曾在生产中还有人用Mextral 84H 调节PH后萃取镍。所以主要影响因素除了萃取剂本身外,跟PH值也有关系。

银提纯正确溶解方法?

 (一)置换法:用化学活动性较大的金属,如锌、铁、铝等。从废定影液中置换出银。用法较简单,用金属粉、金属块和金属条直接加入或插入废定液中,银便被置换附着在金属表面,但置换后的产品不纯,尚需进一步提纯。

  (二)沉淀法:用硫化钠使定影液中的银,以硫化银为形式沉淀出来,再把硫化银沉淀物加入热的盐酸中.并加入过量铁粉,使可得到白银。但产品再需提纯。因硫化氢有毒,操作应在通风处进行。

  (三)电解法:

  直接提取白银,可1次性处理,制得白银质量很纯。电解法中两个电极的正确使用非常重要。当通电后,阳离子即银离子移动,得到电子被还原成银原子在阴极表面堆积;阴离子向阳离子移动,失去电子被氧化,如果电极使用不当,则会造成电极腐蚀,污染溶液。

  因此应将石墨棒(即干电池的中心碳棒)接在直流电源的正级作为阳级;用银棒或不锈钢板接在直流电源的负极作为阳极,一起插入废定影液中进行电解。溶液pH一般调节在2—4(滴加硝酸调节),电压为1伏特,电流密度为0.3A/cms。

  这样,在电解过程中阴极上的银条便由于银的堆积而由小变大,颜色纯自。如果电流大,银沉淀太快,则呈黑色。当电解产物出现棕色时,说明溶液中含银量已经很少了(每公斤含银量少于1克),不宜再电解。

  测定废淀影液含银量多少,能否电解,也可以拿1条干净的铜丝,插入溶液中,2分钟后尚不见铜丝变为银白色,说明溶液中的银难提取了。